Cy5 NHS Ester PEG Cas 146368-15-2 para la entrega apuntada de la droga

Cy5 con Cas.146368-15-2 de la CLAVIJA del éster de NHS se aplica en Bioconjugation

Cy5 es una pequeña molécula orgánica, y se conjuga típicamente a las proteínas vía las aminas primarias (es decir, lysines). Generalmente, entre 3 y 7 moléculas Cy5 se conjugan a cada anticuerpo (óptimo está generalmente 5); conjugaciones más altas pueden dar lugar a problemas de la solubilidad así como amortiguamiento interno (y brillo reducido). Así, un anticuerpo será conjugado generalmente en varias reacciones paralelas a diversas cantidades de Cy5, y los reactivo resultantes serán comparados para el brillo (y la viscosidad del fondo) para elegir el ratio óptimo de la conjugación. Cy5 es excitado típicamente por la línea de 633 nanómetro de laser de HeNe, y la emisión se recoge en 680 nanómetro.

Cy5 covalente se junta a las aminas primarias (lysines) de la inmunoglobulina.

Disuelva el Cy5 en DMSO anhidro inmediatamente antes del uso, en una concentración de 10 mg/ml. No retrase entre la medición del peso del Cy5 y la disolución de él en DMSO; asimismo, no retrase la adición del material solubilizado al anticuerpo.

Para el ratio óptimo de 5:1, añada 40 el µg Cy5 por el magnesio del anticuerpo; mezcla inmediatamente. (Véase las notas sobre alrededor usando diversas raciones molares de Cy5 al anticuerpo).

Envuelva el tubo en hoja; incube y gire en la temperatura ambiente para 1 hora.

Quite el Cy5 unreacted e intercambie el anticuerpo en “almacenador intermediario del almacenamiento” por la filtración o la diálisis de gel.